基于NLRP3通路研究miR-155对THP-1巨噬细胞炎症反应的调控作用

摘要/Abstract

摘要：

［摘要］目的：基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体通路探讨miR-155对脂多糖（LPS）诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法：构建LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎症模型，将细胞分为空白对照组、LPS组、miR-155过表达组和miR-155阴性对照组，实时荧光定量聚合酶链反应检测白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和NLRP3的表达变化；酶联免疫吸附试验测定IL-1β和TNF-α的分泌水平；蛋白质印迹法检测NLRP3和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）的表达。结果：LPS诱导细胞中炎症因子、NLRP3和miR-155表达；过表达miR-155，进一步促进炎症因子NLRP3和Caspase-1蛋白的表达。结论：miR-155通过激活其潜在作用靶点NLRP3促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应。

关键词:

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Abstract:

〔Abstract〕 Objective：To investigate the regulatory effect of miR-155 on lipopolysaccharide （LPS）-induced inflammatory response of THP-1 macrophages based on the nucleotide binding oligomerized domain-like receptor 3 （NLRP3） inflammasome pathway.Method： The LPS-induced inflammatory model of THP-1 macrophages was constructed， the cells were divided into blank control group， LPS group, miR-155 overexpression group and miR-155 negative control group, and real-time quantitative polymerase chain reaction detected the expression changes of interleukin 1β （IL-1β）, tumor necrosis factor α （TNF-α） and NLRP3. Enzyme-linked immunosorbent assay measures the secretion levels of IL-1β and TNF-α; Western blot detection of NLRP3 and cysteine-containing aspartate proteolytic enzyme-1 （Caspase-1）. Results：LPS induced the expression of inflammatory cytokines， NLRP3 and miR-155 in cells； overexpression of miR-155 further promoted the expression of inflammatory cytokines， NLRP3 and Caspase-1 proteins.Conclusion：MiR-155 promotes the LPS induced THP-1 macrophage inflammatory response by activating its potential target NLRP3.

Key words:

"> font-size:10.5pt, ">NLRP3 pathway, miR-155, THP-1 cell, inflammation

中图分类号:

宁晓县, 申元英, 郭　乐.

基于NLRP3通路研究miR-155对THP-1巨噬细胞炎症反应的调控作用 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(10): 32-38.

Ning Xiaoxian, Shen Yuanying, Guo Le.

Regulation of MiR-155 on THP-1 Macrophage Inflammatory Response Based on NLRP3 Pathway [J]. Journal of Dali University, 2022, 7(10): 32-38.

参考文献

〔1〕 CHEN L L， DENG H D， CUI H M， et al. Inflammatory Responses and Inflammation-Associated Diseases in Organs〔J〕. Oncotarget， 2017， 9（6）： 7204-7218.

〔2〕 OISHI Y， MANABE I. Macrophages in Inflammation， Repair and Regeneration〔J〕. Int Immunol，2018，30（11）：511-528.

〔3〕 GUO H F， QIAN L， CUI J W. Focused Evaluation of the Roles of Macrophages in Chimeric Antigen Receptor （CAR） T Cell Therapy Associated Cytokine Release Syn-drome〔J〕. Cancer Biol Med， 2021， 19（3）： 333-342.

〔4〕邹明月，席磊，饶菁菁，等. 佛波酯联合脂多糖诱导THP-1炎症细胞模型的优化及评价〔J〕. 细胞与分子免疫学杂志， 2017， 33（11）： 1456-1461.

〔5〕 MAEＳＳ M B， WITTIG B， CIGNARELLA A， et al. Reduced PMA Enhances the Responsiveness of Trans-fected THP-1 Macrophages to Polarizing Stimuli〔J〕. J Immunol Methods， 2014， 402（1/2）： 76-81.

〔6〕 WANG Z， ZHANG S M， XIAO Y， et al. NLRP3 Inflammasome and Inflammatory Diseases〔J〕. Oxid Med Cell Longev， 2020， 2020： 4063562.

〔7〕 MANGAN M S J， OLHAVA E J， ROUSH W R， et al. Targeting the NLRP3 Inflammasome in Inflammatory Diseases〔J〕. Nat Rev Drug Discov， 2018， 17（8）： 588-606.

〔8〕 CAO Z R， WANG Y H， LONG Z M， et al. Interaction between Autophagy and the NLRP3 Inflammasome〔J〕. Acta Biochim Biophys Sin（Shanghai）， 2019， 51（11）： 1087-1095.

〔9〕王兵兵. 消退素D1对急性胰腺炎自噬和NLRP3炎症体通路的作用研究〔D〕. 合肥：安徽医科大学， 2018.

〔10〕 SALIMINEJAD K， KHORRAM KHORSHID H R， SOLEY-MANI FARD S， et al. An Overview of microRNAs： Biology，Functions，Therapeutics，and Analysis Methods〔J〕. J Cell Physiol， 2019， 234（5）： 5451-5465.

〔11〕 ELTON T S， SELEMON H， ELTON S M， et al. Regulation of the MIR155 Host Gene in Physiological and Pathological Processes〔J〕. Gene， 2013， 532（1）： 1-12.

〔12〕王一霖，滕亮，王中志，等. miR-155-5p靶向核因子κB抑制蛋白E在人单核巨噬细胞抗新生隐球菌免疫反应中的机制研究〔J〕. 中国感染与化疗杂志， 2019， 19（5）： 542-547.

〔13〕 ZHOU D X， HUANG C， LIN Z， et al. Macrophage Polarization and Function with Emphasis on the Evolving Roles of Coordinated Regulation of Cellular Signaling Pathways〔J〕. Cell Signal， 2014， 26（2）： 192-197.

〔14〕杨敏华，姚友杰，王娟. 姜油酮通过激活Nrf2通路减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤〔J〕. 西安交通大学学报（医学版）， 2020， 41（1）： 150-156.

〔15〕赵蓓，殷亦男，王程燕，等. 牡荆素调控M1/M2型巨噬细胞极化抗肺腺癌转移的作用研究〔J〕. 中国免疫学杂志， 2020， 36（20）： 2456-2461.

〔16〕徐锋. 基于NLRP3炎症小体通路桂枝抗炎有效部位抗炎作用机制研究〔D〕. 成都：成都中医药大学， 2017.

〔17〕 JIN C C， FRAYSSINET P， PELKER R， et al. NLRP3 Inflammasome Plays a Critical Role in the Pathogenesis of Hydroxyapatite-Associated Arthropathy〔J〕. Proc Natl Acad Sci USA， 2011， 108（36）： 14867-14872.

〔18〕 KARASAWA T， TAKAHASHI M. Role of NLRP3 Inflammasomes in Atherosclerosis〔J〕. J Atheroscler Thromb， 2017， 24（5）： 443-451.

〔19〕 CORREIA DE SOUSA M， GJORGJIEVA M， DOLICKA D， et al. Deciphering miRNAs' Action through miRNA Editing〔J〕. Int J Mol Sci， 2019， 20（24）： 6249.

〔20〕 XUE Z Y， XI Q， LIU H K， et al. ＭiR-21 Promotes NLRP3 Inflammasome Activation to Mediate Pyroptosis and Endotoxic Shock〔J〕. Cell Death Dis， 2019， 10（6）： 461.

〔21〕 DING H Y， LI J X， LI Y， et al. ＭicroRNA-10 Negatively Regulates Inflammation in Diabetic Kidney via Targeting Activation of the NLRP3 Inflammasome〔J〕. Mol Ther， 2021， 29（7）： 2308-2320.

〔22〕 NAHID M A， SATOH M， CHAN E K. ＭicroRNA in TLR Signaling and Endotoxin Tolerance〔J〕. Cell Mol Immunol， 2011， 8（5）： 388-403.

〔23〕 LU D， YAMAWAKI T， ZHOU H， et al. Limited Differential Expression of miRNAs and other Small RNAs in LPS-Stimulated Human Monocytes〔J〕. PLoS One， 2019， 14（3）： e0214296.

〔24〕 FAN Z Y， LIU Y H， SHI Z L， et al. ＭiR-155 Promotes Interleukin-1β-Induced Chondrocyte Apoptosis and Cata-bolic Activity by Targeting PIK3R1-Mediated PI3K/Akt Pathway〔J〕. J Cell Mol Med， 2020， 24（15）： 8441-8451.

〔25〕 XUE H， HUA L M， GUO M， et al. SHIP1 Ｉs Targeted by miR-155 in Acute Myeloid Leukemia〔J〕. Oncol Rep， 2014， 32（5）： 2253-2259.

[1]	黄艳敏, 庞秀琴, 许静蕾, 唐宋元, 李勇鍵, 杨志斌, 肖　怀. 药用昆虫凹纹胡蜂三氯甲烷部位化学成分研究 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 1-5.
[2]	段雪玉, 刘晓波, 陈瑞祥, 施　敏. 处方前置审核系统对门急诊PPIs处方合格率的影响 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 12-15.
[3]	毛盼盼, 李兴德, 张　阳, 刘　璐, 蔡曼玲, 徐志锋, 宋沧桑. 失效模式与效应分析在预防医院用药差错/用药接近差错中的应用 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 16-20.
[4]	张　平, 方　琼, 周　华. 水溶性蜂胶对酒精加重溃疡性结肠炎发作的影响和机制研究 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 21-27.
[5]	陈兆芳, 曹晓兰, 余文静, 杜　涓, 武有聪. 云南某地区少数民族农户自制酥油中常见致病菌的检测 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 33-36.
[6]	樊玉娟, 李福兴, 王黎, 程明璟, 肖敏, 熊苗苗, 赵卫东. 幽门螺杆菌悉尼标准菌株传代培养方法研究 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 37-40.
[7]	秦　燕, 胡亚荣, 苏　娟, 来明名, 刘云春, 杨雯娟. 基础医学实验教学形成性评价体系的构建与应用 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 55-57.
[8]	徐安书, 侯　勇, 孙　勇, 杨晓宾, 周莉花, 傅朝春. 二步分层法腹腔镜左半肝切除术的临床应用 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 58-61.
[9]	吴泽宇, 岑键昌, 欧阳超, 李泽奇, 谢仁华, 高　鸿, 苏　平. 13例孕产妇并发颅内静脉窦血栓的临床分析 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 62-65.
[10]	孙东燕, 姜雪丽, 刘清兰, 杨儒宸, 杨永艳, 赵兴美. 艾司氯胺酮复合右美托咪定/咪达唑仑术前镇静治疗的临床观察 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 66-70.
[11]	刘晓军, 罗春霞, 杨莹美. 超声造影在乳腺良恶性肿瘤诊断中的应用价值分析 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 71-74.
[12]	姚昔友, 王　进, 詹学良, 高　翔, 徐文波, 冯　磊. 急诊血液检验对野生菌中毒诊断的临床意义 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 75-78.
[13]	贾　寒, 徐佳琪, 李福兴, 忽胜和. 2015—2020年大理市某医院肺炎支原体感染分布和耐药性分析 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 79-82.
[14]	段丽屏. 2015—2019年某三甲医院ICU医院感染现患率调查情况分析 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 83-86.
[15]	王　双, 徐文文, 汤　珺. 大理白族自治州糖尿病患者护理需求及影响因素分析 [J]. 大理大学学报, 2022, 7(8): 87-91.